m6A修饰质谱定量分析

• 目前已知在细胞的RNA 分子上有超过100 种不同的化学修饰。在mRNA（编码蛋白质的基因）分子中，腺嘌呤核苷（Adenosine，A）嘌呤碱基的N6 甲基化（N6-Methyladenosine，m6A）是mRNA 分子中丰度最高的修饰。

• m6A 的动态修饰变化参与调控众多生理过程，并与肿瘤发生/ 发展相关联（Cell 2017, 169, 1187-1200；Genomics, Proteomics & Bioinformatics 2017, 15, 154-16）。

• 除了m6A-seq 和MeRIP-seq 等（Frontiers in Immunology 2019, 10, 922）能比较分析样本之间总的m6A 水平的差异变化，利用质谱（MS）可实现对多样本之间的m6A 水平的相对和绝对定量是m6A 修饰研究必不可少的数据，是对m6A-seq 和MeRIP-seq 等实验方法的有力补充。

• 质谱检测样本中总m6A 水平是基于MRM（Multiple Reaction Monitoring）技术原理进行的，即利用核苷分子在质谱上获得的前体离子/ 碎片离子对（Precursor/product ion pair）信息，实现对核苷的定性和定量分析，比如m6A在质谱上其Precursor/product ion pair 为282.1Da/150.1Da。