产品简介:
MG03是谱璟科技针对单次跨膜的蛋白质(single transmembrane protein)开发的质谱级Co-IP样品制备试剂盒。可助力用户借助Co-IP结合质谱探索膜蛋白的相互作用复合物。
本试剂盒仅对单次跨膜的蛋白质进行了优化,请用户知悉。
保存条件:
-80°C,一年有效。
注意事项:
蛋白酶和磷酸酶抑制剂需用户自备。
台式离心机(>16000g,含制冷功能)需用户自备。
旋转混合仪需用户自备或咨询我司购买(产品链接)。
本产品仅对细胞系样本进行了优化,未对组织样品进行测试,请用户知悉。
请用户使用产品说明书中提供的3×FLAG标签序列构建过表达质粒。
质粒转化、转染级别质粒抽提等全套试剂需用户自备。
一次性针头注射器(5、10、20ml)、0.45μm一次性注射针头滤器需用户自备。
5ml、15ml离心管需用户自备。
SDS-PAGE电泳、western blot系统及考马斯亮蓝染色等需用户自备。
超纯水/系统需用户自备。
本产品仅供科研使用!
实验数据:
MG03用于单次跨膜蛋白的质谱级Co-IP样品制备。(A)过表达的pBait-3×FLAG蛋白能发生糖基化修饰,提示蛋白质是跨膜蛋白。(B)质谱级Co-IP样品制备。过表达组与对照组相比,Bait蛋白富集明显,同时有差异条带(*标注)。
更多事项:
上述为普通的质谱级Co-IP实验数据,差异条带进行质谱检测后,仅能提供定性信息,无法区分特异性和非特异性互作。故而,需研究者自行挑选潜在互作蛋白质进行Co-IP结合WB验证(可选择我司产品:W02)。
我司更推荐使用SILAC技术(我司SILAC产品链接)结合MG03进行快速的互作蛋白筛选(~几十个)。
样品质谱检测可委托我司进行相应的检测分析。如用SILAC结合MG03,我司可对质谱数据进行完整的分析包括(1)提供完整的数据分析图表。(2)潜在的特异性互作蛋白列表。
MG03可用于瞬转细胞或者稳定细胞株样品的质谱级Co-IP样本制备。
对于制备质谱级Co-IP样品,我司推荐用SDS-PAGE胶分离、考染观察并切割bait蛋白及其他差异条带进行质谱检测。不推荐直接进行digest on-beads方式进行后续质谱检测分析。