产品简介:
谱璟科技开发的MG04:胞质与胞核Co-IP富集试剂盒(质谱级)是针对细胞质和细胞核均有定位的靶蛋白(Bait)进行Co-IP富集并进行质谱鉴定/定量的产品。
本试剂盒仅细胞系样本进行了优化,请用户知悉。
保存条件:
-80°C,一年有效。
注意事项:
蛋白酶和磷酸酶抑制剂需用户自备。
台式离心机(>16000g,含制冷功能)需用户自备。
旋转混合仪需用户自备或咨询我司购买(产品链接)。
本产品仅对细胞系样本进行了优化,未对组织样品进行测试,请用户知悉。
请用户使用产品说明书中提供的3×FLAG标签序列构建过表达质粒。
质粒转化、转染级别质粒抽提等全套试剂需用户自备。
一次性针头注射器(5、10、20ml)、0.45μm一次性注射针头滤器需用户自备。
5ml、15ml离心管需用户自备。
SDS-PAGE电泳、western blot系统及考马斯亮蓝染色等需用户自备。
超纯水/系统需用户自备。
本产品仅供科研使用!
实验数据:
MG04进行细胞质和细胞核靶蛋白(Bait)相互作用复合物富集。A. 细胞核、质分离WB检测。可见Bait蛋白质主要定位在细胞质中,细胞核中有少量的定位。B. 质谱级Co-IP样本制备。可见在细胞质组分中(CF),bait蛋白富集明显,同时与对照组相比,有显著的差异富集条带。在细胞核组分中(NF)富集的量少,故而用银染染色。
更多事项:
上述为普通的质谱级Co-IP实验数据,差异条带进行质谱检测后,仅能提供定性信息,无法区分特异性和非特异性互作。故而,需研究者自行挑选潜在互作蛋白质进行Co-IP结合WB验证(可选择我司产品:W02)。
我司更推荐使用SILAC技术(我司SILAC产品链接)结合MG03进行快速的互作蛋白筛选(~几十个)。
样品质谱检测可委托我司进行相应的检测分析。如用SILAC结合MG04,我司可对质谱数据进行完整的分析包括(1)提供完整的数据分析图表。(2)潜在的特异性互作蛋白列表。
MG04可用于瞬转细胞或者稳定细胞株样品的质谱级Co-IP样本制备。
对于制备质谱级Co-IP样品,我司推荐用SDS-PAGE胶分离、考染观察并切割bait蛋白及其他差异条带进行质谱检测。不推荐直接进行digest on-beads方式进行后续质谱检测分析。