产品简介:
免疫沉淀/免疫共沉淀 (Immunoprecipitation/Co-immunoprecipitation, IP/Co-IP)是经典地研究蛋白质-蛋白质相互作用 (Protein-Protein Interaction, PPI) 和蛋白质翻译后修饰 (Post-translational Modification, PTM) 的实验技术。其原理是将针对目标蛋白 (Target Protein) 的抗体与从细胞或组织中提取的蛋白质溶液 (Protein lysate) 孵育,借助抗体的特异性,捕获目标蛋白-相互作用蛋白复合物,后续向反应体系中加入Protein A/G偶联的琼脂糖珠子 (Agarose beads) 或者磁珠 (Magnetic beads),富集目标蛋白-相互作用蛋白复合物后,最后通过western blot实现对目标蛋白及其潜在互作蛋白的检测。
在IP/Co-IP过程中,非特异性的蛋白质粘附是不可避免的。为了降低非特异性粘附蛋白对后续实验结果的干扰,需要优化洗涤缓冲液成分和洗涤条件,从而减少/去除非特异性结合蛋白。
本公司生产的IP/Co-IP洗涤液 (B004),是专门针对IP/Co-IP优化的洗涤液,可降低IP/Co-IP过程中的非特异性蛋白质粘附。
本产品配备了即用型5 × SDS-PAGE上样缓冲液 (B011),为用户实验提供了更多的便捷性。
保存条件:
-20ºC保存,一年有效。
注意事项:
蛋白酶和磷酸酶抑制剂(Protease & Phosphatase inhibitor cocktail)需用户自备。
本产品适合常规的IP/Co-IP实验的洗涤过程。对于特殊条件的IP/Co-IP,用户可能需要优化洗涤条件或参考文献以选择更为合适的IP洗涤液。
本产品仅供科研使用!
产品包装:
产品编号 | 产品名称 | 规格 |
B004 | IP/Co-IP洗涤液 | 1*100ML |
B011 | 5xSDS-PAGE上样缓冲液 | 1*1ML |
— | 说明书 | 1份 |
实验数据:
B004能显著去除Co-IP过程中的非特异性粘附,提升数据质量。蛋白质A和B是已知的一对互作蛋白。按照Input的质粒组合共转染细胞后,用anti-FLAG抗体进行Co-IP,Co-IP产物用B004或PBS进行洗涤。(1)从PBS洗涤组可见(IP中泳道),A蛋白被anti-FLAG抗体或beads非特异性地富集(*标注条带);(2)而B004洗涤组则去除了这种非特异性结合(IP左泳道),显著衬托并提升了蛋白质A与B存在相互作用的数据质量(IP右泳道)。