简介:
DMEM是广泛使用的哺乳动物细胞培养基,在培养基中添加了哺乳动物细胞不能自身合成的氨基酸——“必需氨基酸”,如K(Lysine,赖氨酸)和 R(Arginine,精氨酸)。在K和R中的元素组成为12C、14N和H1。为了说明方便,我们将普通的K和R分别记为K0和R0。
SILAC(Stable Isotope Labeling with Amino acids in Cell culture)培养基是用稳定同位素(13C、15N、2H)标记的K和R替换普通培养基中的K0和R0,在后续的细胞培养过程中,稳定同位素标记的K和R掺入到细胞的每一个蛋白质分子中,从而实现对细胞蛋白质组(Proteome)的标记。
为什么要选取K和R做SILAC标记的氨基酸呢?是因为后续蛋白质在质谱分析之前,要先用胰蛋白酶(Trypsin)将蛋白质“切割”成肽段,Trypsin特异性地从蛋白质的K和R残基处“切割”,最终超过95%的肽段都是以K和R结尾的,将来的质谱定量信息丰富,定量结果更为精准。
为了提高细胞SILAC标记效率,培养所添加的血清必须为透析血清(Dialyzed FBS for SILAC),切勿用普通血清!
SILAC实验设计组合及氨基酸信息
产品售价:
K0R0是对照培养基,除了了K和R之外,其成分与K4R6、K8R10完全一样,是理想的SILAC实验对照培养基。
每Kit配备对应数量的D-FBS (Dialyzed FBS),以保障所用血清成分一样,消除D-FBS不同所引起的可能实验差异。
用户如需其他类型的组合 (如K6R6、K6R10等),请联系我司技术支持。
产品说明书:
细胞SILAC标记实验流程: